Le test d'activation des basophiles dans le diagnostic in vitro de l'allergie

Le test d'activation des basophiles dans le diagnostic in vitro de l'allergie PDF Author: elsa Lecoin
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Languages : fr
Pages : 120

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Book Description
Cette thèse présente une synthèse générale sur l’allergie, le basophile et le diagnostic de l’allergie, suivie d’une étude expérimentale sur un examen de diagnostic de l’allergie, le test d’activation des basophiles en cytométrie en flux. Nous avons d’abord établi des valeurs de répétabilité et de reproductibilité. Compte tenu des bons résultats de cette validation technique, nous avons poursuivi en analysant certains paramètres de la réponse des basophiles vis-à-vis de différents allergènes d’intérêt clinique.Nous avons confirmé, dans le cadre du test diagnostique humain, que la réponse d’activation du basophile exprimée par la proportion de cellules CD63+ dépend de la concentration d’allergène. Cette réponse n’est pas linéaire ou sigmoïde, mais en cloche avec un pic d’activation pour une concentration donnée qui diffère suivant le patient, l’allergène, la clinique. Un autre paramètre permet d’interpréter ce test, c’est la MFI de CCR3, qui diminue dans le cas des allergènes médicamenteux. Dans la plupart des cas d’activation par des allergènes alimentaires ou aéroportés, la variation du CCR3 est également opposée à celle du CD63.A travers notre étude, nous avons vu que le test d’activation des basophiles est reproductible et répétable. L’interprétation du résultat de ce test doit prendre en compte la concentration de l’allergène, du type de l’allergène, de la clinique du patient, de la sensibilité du patient à l’allergène. Techniquement, le test est stable au sein d’un même laboratoire ; des études interlaboratoire sont nécessaires afin d’envisager la certification selon la norme européenne ISO 15189 exigible des examens de biologie médicale à l'horizon 2016 en France.

Le test d'activation des basophiles dans le diagnostic in vitro de l'allergie

Le test d'activation des basophiles dans le diagnostic in vitro de l'allergie PDF Author: elsa Lecoin
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Cette thèse présente une synthèse générale sur l’allergie, le basophile et le diagnostic de l’allergie, suivie d’une étude expérimentale sur un examen de diagnostic de l’allergie, le test d’activation des basophiles en cytométrie en flux. Nous avons d’abord établi des valeurs de répétabilité et de reproductibilité. Compte tenu des bons résultats de cette validation technique, nous avons poursuivi en analysant certains paramètres de la réponse des basophiles vis-à-vis de différents allergènes d’intérêt clinique.Nous avons confirmé, dans le cadre du test diagnostique humain, que la réponse d’activation du basophile exprimée par la proportion de cellules CD63+ dépend de la concentration d’allergène. Cette réponse n’est pas linéaire ou sigmoïde, mais en cloche avec un pic d’activation pour une concentration donnée qui diffère suivant le patient, l’allergène, la clinique. Un autre paramètre permet d’interpréter ce test, c’est la MFI de CCR3, qui diminue dans le cas des allergènes médicamenteux. Dans la plupart des cas d’activation par des allergènes alimentaires ou aéroportés, la variation du CCR3 est également opposée à celle du CD63.A travers notre étude, nous avons vu que le test d’activation des basophiles est reproductible et répétable. L’interprétation du résultat de ce test doit prendre en compte la concentration de l’allergène, du type de l’allergène, de la clinique du patient, de la sensibilité du patient à l’allergène. Techniquement, le test est stable au sein d’un même laboratoire ; des études interlaboratoire sont nécessaires afin d’envisager la certification selon la norme européenne ISO 15189 exigible des examens de biologie médicale à l'horizon 2016 en France.

Apport du test d'activation des basophiles dnas le diagnostic de l'allergie aux protéines de lait de vache de l'enfant

Apport du test d'activation des basophiles dnas le diagnostic de l'allergie aux protéines de lait de vache de l'enfant PDF Author: Véronique Grandné
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Languages : fr
Pages : 176

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L'allergie aux protéines de lait de vache représente près de 15 % des allergies alimentaires de l'enfant. Un diagnostic bien posé est nécessaire pour adapter la prise ne charge de l'enfant. Les test recommandés par l'arbre diagnostique habituel sont les testes cutanés et la recherche des IgE sériques spécifiques. Cependant, ils peuvent être négatifs alors que l'allergie est cliniquement présente. Le clinicien aura alors recours au test de provocation par voie orale (TPO) qui est considéré comme le test de référence d'une allergie alimentaire. Ce test (test in vivo) peut être potentiellement dangereux de par la survenue de réactions allergiques sévères mais c'est aussi un test coûteux. Nous avons comparé le recours au test d'activation des basophiles au lait de vache (test in vitro) au TPO dans le cadre particulier de l'allergie aux protéines de lait de vache clinique de l'enfant mais avec des tests cutanés négatifs et un dosage d'IgE spécifiques indétectable. Ce test pourrait ainsi avoir sa place dans l'arbre diagnostic de l'allergie aux protéines de lait de vache de l'enfant en 3èùe ligne, avant la réalisation d'un TPO, permettant de confirmer le diagnostic d'APLV et ainsi d'adapter la prise en charge. Il permet également le suivi de ces enfant, évitant les tests de réintroduction trop précoces

Evaluation du test d' activation des basophiles comme outil diagnostique de l' allergie à l' arachide, à la noisette et aux protéines de lait de vache en pédiatrie

Evaluation du test d' activation des basophiles comme outil diagnostique de l' allergie à l' arachide, à la noisette et aux protéines de lait de vache en pédiatrie PDF Author: Marion Raveau
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Languages : fr
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CONTEXTE : Les allergies à l'arachide, à la noisette et aux protéines de lait de vache sont parmi les plus fréquentes chez les enfants et peuvent être responsables de réactions sévères. Le diagnostic positif précis repose sur différents tests dont le test de provocation oral (TPO), pourvoyeur potentiellement de réactions graves chez le patient. Dans ce contexte est apparu une alternative, le test d'activation des basophiles (TAB), qui permet de déterminer l'équivalent d'un seuil réactogène in vitro sur une simple prise de sang. OBJECTIF : L'objectif initial est de déterminer la place du TAB vis-à-vis des autres outils diagnostiques de l'allergie alimentaire en comparant ses différents marqueurs (CDmax, le CDsens et l'AUC) au résultat du TPO pratiqué le même jour. Puis de définir les seuils réactogènes optimaux du TAB, afin de prédire le résultat du TPO, la dose réactogène ainsi que la sévérité des réactions cliniques potentielles. MÉTHODE : Nous avons analysé les données des TAB en parallèle des TPO réalisés à l'hôpital de jour de pédiatrie, en nous basant uniquement sur l'analyse du marqueur CD63, chez 108 enfants allergiques à l'arachide, 27 à la noisette et 50 aux protéines de lait de vache. Des seuils quantitatifs optimaux ont été définis pour le CDmax, le CDsens et l'AUC, en utilisant la méthode de Youden. RÉSULTATS : Concernant l'allergie à l'arachide, 10 patients ont été exclus en raison d'un TAB ininterprétable. Parmi les 98 enfants inclus, nous avons trouvé 80.6 % de concordance entre les résultats du TAB et du TPO dans le diagnostic de l'allergie à l'arachide. L'analyse des courbes ROC des paramètres du TAB a montré que le CDmax et l'AUC après stimulation par f13 ou Ara h 2 semblaient être les meilleurs marqueurs associés à une réactivité lors du TPO avec une excellente valeur prédictive positive et une très bonne valeur prédictive négative. Nous avons également démontré que la survenue d'une réaction en deçà d'une dose réactogène seuil fixée à 200 mg de protéine d'arachide (correspondant à l'ED50) pouvait être anticipée par l'analyse des données du TAB chez les patients allergiques. Néanmoins, bien qu'une corrélation entre le TAB et le grade de la réaction lors du TPO ait été observée, l'analyse des patients selon l'intensité des symptômes survenus lors du TPO n'a pas permis d'identifier de marqueurs prédictifs de la gravité des réactions. Concernant l'allergie à la noisette, nous avons montré que les 3 marqueurs du TAB (CDmax, AUC et CDsens) semblaient être des marqueurs fiables pour prédire la réactivité lors du TPO. Les seuils quantitatifs optimaux ont tous atteint une VPP de 100 %. De façon intéressante, nous avons montré que le TAB semblait être un bon moyen pour prédire une réaction en dessous d'une dose réactogène seuil (fixée à partir de l'ED50 à 80.6 mg de protéines) et la sévérité clinique des réactions observées lors du TPO. Pour l'allergie aux protéines de lait de vache, l'analyse a été limitée par le nombre important de TAB ininterprétables, pour des raisons techniques que nous avons identifiées, entraînant l'exclusion de 23 patients (46%). Nous avons montré que le TAB permettait de mettre en évidence de façon fiable les patients non (ou plus) allergique grâce à la définition de seuils optimaux déterminés à partir de courbes ROC, avec une excellente valeur prédictive négative pour l'ensemble des marqueurs du TAB (CDmax (95.8 %), AUC (95.7 %), CDsens (100 %)). CONCLUSION : L'ensemble de ces résultats apportent des éléments objectifs laissant penser que le TAB est un outil complémentaire intéressant dans le diagnostic des allergies à l'arachide, à la noisette et aux protéines de lait de vache, permettant notamment d'éviter la réalisation de TPO inutiles chez des patients tolérants envers l'allergène et une adaptation personnalisée des protocoles de TPO dans le cas des allergies sévères pour éviter les risques liés à ce test.

Evaluation de l' intérêt du test d' activation des basophiles comme outil de diagnostic de l' allergie à l' arachide et aux protéines de lait de vache

Evaluation de l' intérêt du test d' activation des basophiles comme outil de diagnostic de l' allergie à l' arachide et aux protéines de lait de vache PDF Author: Marine Godignon
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Languages : fr
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Introduction : L' allergie alimentaire constitue un problème de Santé Publique. L' allergie à l' arachide et aux protéines de lait de vache sont fréquentes, la nécessité de poser un diagnostic fiable permet une prise en charge adaptée de l' enfant. L' altération de la qualité de vie pour l' enfant et sa famille ainsi que les risques encourus lors du test de provocation par voie orale (TPO) ont conduit les pédiatres à rechercher une méthode alternative moins risquée mais tout autant sensible et spécifique que le TPO. Ainsi, le test d' activation des basophiles (TAB) pourrait représenter une alternative au gold standard dansle diagnostic de l' allergie alimentaire, le TPO. Objectifs : Nous avons élaboré une nouvelle méthode de calcul du CDsens basée sur 6 concentrations d' allergène. puis nous avons comparé les résultats obtenus à l' issu du TPO à ceux du TAB. Enfin, nous avons déterminé des valeurs seuils pour les différents paramètres du TAB afin de prévoir au mieux la réaction clinique de l' enfant lors de l' ingestion de l' allergène. Méthodes : Nous avons analysé 51 TAB dans le cadre de l' allergie à l' arachide et 20 pour l' allergie aux protéines de lait de vache, l' ensemble de ces patients avait réalisé un TPO le même jour pour l' allergène suspecté. Résultats : Dans le cadre de l' allergie à l' arachide, le CDmax et l' AUC après stimulation par f13 et Ara h 2 pour le CD63 et le CD203c se sont montrés très pertinent pour discriminer les patients allergiques des patients simplement sensibilisés. Ces deux marqueurs se sont révélés corrélés à la dose réactogène et à la sévérité clinique observée lors du TPO, contrairement au CDsens. Sept patients ont eu des résultants discordants (TAB+/TPO-), ces patients étaient pour la mojorité en cours de protocole d' induction de tolérance par voie orale (ITO). Concernant les TAB aux protéines de lait de vache, les résultats ont été plus difficilement exploitables. En effet, sur les 20 TAB réalisés seulement 10 ont pu être exploité, 10 avaient été exclus en raison d' une activation des basophiles dans le contrôle négatif. Le CDmax et l' AUC après stimulation par f2 et f78 pour le CD63 et CD203c ont montré une corrélation avec la dose réactogène. Concernant l' activation des basophiles dans le contrôle négatif observée pour 10 patients, le dosage des IgE spécifiques dirigées contre 12 albumines différentes a été réalisé. Les 10 patients présentaient une sensibilisation contre au moins une de ces albumines. Conclusion : Le TAB montre ainsi son intérêt dans le diagnostic de l' allergie à l' arachide par le suivi du CDmax ou l' AUC. Une mise en routine et une standardisation de ce test permettraient de diminuer considérablement le nombre de TPO. Concernant les TAB aux protéines de lait de vache, la poursuite de cette étude sur une plus grande cohorte de patients serait nécessaire. Cependant, les premiers résultats obtenus montraient que le CDmax et l' AUC pourraient être des outils pertinents dans le cadre de l' allergie aux protéines de lait de vache. Il serait intéressant de mettre en place un nouveau protocole de TAB pour le lait de vache afin d' éviter l' activation des basophiles dans le contrôle négatif.

Cumulated Index Medicus

Cumulated Index Medicus PDF Author:
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Category : Medicine
Languages : en
Pages : 2062

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The HLA Complex in Biology and Medicine

The HLA Complex in Biology and Medicine PDF Author: Narinder K Mehra
Publisher: Boydell & Brewer Ltd
ISBN: 9788184488708
Category : Medical
Languages : en
Pages : 616

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A comprehensive guide to the HLA (Human Leukocyte Antigen) system for immunologists and clinicians, this book contains up-to-date information on the MHC (Major Histocompatibility Complex) and its role in the immune response and in various diseases. The book explores the biological significance and role of the HLA system in organ and haematopoietic stem cell transplantation management. This volume is an invaluable guide to the full spectrum of HLA-related science while also serving as a conceptual and technical resource for those involved in HLA-related research and in clinical or surgical practice. In addition, it will be a primary point of contact for individuals working in other areas who suddenly find that their research is drawing them into the complexities of HLA genetics.

Manual of Contact Dermatitis

Manual of Contact Dermatitis PDF Author: Sigfrid Fregert
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Category : Contact dermatitis
Languages : en
Pages : 116

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Molecular Allergy Diagnostics

Molecular Allergy Diagnostics PDF Author: Jörg Kleine-Tebbe
Publisher: Springer
ISBN: 3319424998
Category : Medical
Languages : en
Pages : 537

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This book, based on a recent German publication, offers an overview of basic data and recent developments in the groundbreaking field of molecular allergology. It comprehensively explores the origin and structure of single allergen molecules ("components") and their utility in improving the management of type I, IgE-mediated allergic reactions and disorders like allergic respiratory diseases, food allergies, and anaphylaxis. Highly specific testing, called component-resolved diagnostics, aims to identify and utilize single molecules. Over 200 single allergens from plant or animal sources have been applied to single or multiplex laboratory testing for the presence of allergen-specific IgE. This leap in assay sensitivity and specificity has led to three major advances in patient management: discrimination between primary allergic sensitization and complex cross-reactivity, recognition of IgE profiles for certain allergens and identification of patients most likely to benefit from allergen-specific immunotherapy. The book discusses in detail the benefits and limitations of this 21st century technology, and offers suggestions for the use of molecular allergology in routine clinical practice. It is a “must read” for physicians treating allergic patients as well as scientists interested in natural allergic molecules and their interactions with the human immune system.

Mast Cells and Basophils

Mast Cells and Basophils PDF Author: Gianni Marone
Publisher: Academic Press
ISBN: 0080535852
Category : Medical
Languages : en
Pages : 738

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Book Description
Mast Cells and Basophils will be essential reading for immunologists, biochemists and medical researchers. Detailed chapters cover all aspects of mast cell and basophil research, from cell development, proteases, histamine, cysteinyl leukotrienes, physiology and pathology to the role of these cells in health and disease. Chapters also discuss the clinical implications of histamine receptor antagonists.

Human Basophils and Mast Cells

Human Basophils and Mast Cells PDF Author: Gianni Marone
Publisher:
ISBN:
Category : Medical
Languages : en
Pages : 264

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