Author: Matthieu Fourel
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Languages : fr
Pages : 94

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Les allergies alimentaires sont très fréquentes et touchent environ 3,5% de la population mondiale, avec une prévalence plus importante chez les enfants : 5 à 8% chez les moins de 4 ans contre 1 à 2% chez les adultes. Cette forte prévalence pédiatrique est d'autant plus inquiétante qu'elle a augmenté de près de 20% entre 1997 et 2007. La fréquence élevée conjuguée à la gravité de certaines réactions allergiques - pouvant conduire à un choc anaphylactique -, confèrent aux méthodes diagnostiques une importance toute particulière. Un panel de tests permet aujourd'hui de caractériser une hypersensibilité allergique avec précision : les tests cutanées (Skin Prick Test), le dosage des IgE spécifiques, le test d'activation des basophiles (TAB) et les tests de provocation orales (TPO). Le test d'activation des basophiles est un test fonctionnel ayant pour but de reproduire in vitro la réaction d'hypersensibilité allergique se déroulant in vivo par mise en contact de cellules sanguines avec l'allergène incriminé. L'étude décrite dans cette thèse porte sur deux populations pédiatriques : la première intéresse 4 patients allergiques à l'arachide, âgés de 4 à 11 ans, et la seconde comporte 8 patients présentant une allergie aux protéines du lait de vache (APLV), âgés de 7 mois à 7 ans. L'originalité de l'étude réside dans l'analyse des résultats des TAB, qui a utilisé trois modes d'expression : le CDsens, le CDmax et l'AUC (Aire sous la courbe). Les résultats de cette étude préliminaire ne semblent pas montrer de corrélation évidente entre les résultats du TAB et l'issue du TPO, pour l'allergie à l'arachide comme pour l'APLV. Il faut cependant souligner la positivité systématique du TAB des patients ayant échoué à leurs TPO ainsi que la bonne tolérance au TPO chez tous les patients dont le TAB est négatif. Ces résultats sont, bien sûr, à nuancer du fait du faible échantillon de patients. Malgré des résultats mitigés, la démarche de prise en charge associant les données factuelles recueillies par les IgE spécifiques, les tests cutanés et les TAB semble encourageante pour une prise de décision raisonnée dans la réalisation d'un TPO

Author: elsa Lecoin
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Languages : fr
Pages : 120

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Cette thèse présente une synthèse générale sur l’allergie, le basophile et le diagnostic de l’allergie, suivie d’une étude expérimentale sur un examen de diagnostic de l’allergie, le test d’activation des basophiles en cytométrie en flux. Nous avons d’abord établi des valeurs de répétabilité et de reproductibilité. Compte tenu des bons résultats de cette validation technique, nous avons poursuivi en analysant certains paramètres de la réponse des basophiles vis-à-vis de différents allergènes d’intérêt clinique.Nous avons confirmé, dans le cadre du test diagnostique humain, que la réponse d’activation du basophile exprimée par la proportion de cellules CD63+ dépend de la concentration d’allergène. Cette réponse n’est pas linéaire ou sigmoïde, mais en cloche avec un pic d’activation pour une concentration donnée qui diffère suivant le patient, l’allergène, la clinique. Un autre paramètre permet d’interpréter ce test, c’est la MFI de CCR3, qui diminue dans le cas des allergènes médicamenteux. Dans la plupart des cas d’activation par des allergènes alimentaires ou aéroportés, la variation du CCR3 est également opposée à celle du CD63.A travers notre étude, nous avons vu que le test d’activation des basophiles est reproductible et répétable. L’interprétation du résultat de ce test doit prendre en compte la concentration de l’allergène, du type de l’allergène, de la clinique du patient, de la sensibilité du patient à l’allergène. Techniquement, le test est stable au sein d’un même laboratoire ; des études interlaboratoire sont nécessaires afin d’envisager la certification selon la norme européenne ISO 15189 exigible des examens de biologie médicale à l'horizon 2016 en France.

Author: Véronique Grandné
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Languages : fr
Pages : 176

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L'allergie aux protéines de lait de vache représente près de 15 % des allergies alimentaires de l'enfant. Un diagnostic bien posé est nécessaire pour adapter la prise ne charge de l'enfant. Les test recommandés par l'arbre diagnostique habituel sont les testes cutanés et la recherche des IgE sériques spécifiques. Cependant, ils peuvent être négatifs alors que l'allergie est cliniquement présente. Le clinicien aura alors recours au test de provocation par voie orale (TPO) qui est considéré comme le test de référence d'une allergie alimentaire. Ce test (test in vivo) peut être potentiellement dangereux de par la survenue de réactions allergiques sévères mais c'est aussi un test coûteux. Nous avons comparé le recours au test d'activation des basophiles au lait de vache (test in vitro) au TPO dans le cadre particulier de l'allergie aux protéines de lait de vache clinique de l'enfant mais avec des tests cutanés négatifs et un dosage d'IgE spécifiques indétectable. Ce test pourrait ainsi avoir sa place dans l'arbre diagnostic de l'allergie aux protéines de lait de vache de l'enfant en 3èùe ligne, avant la réalisation d'un TPO, permettant de confirmer le diagnostic d'APLV et ainsi d'adapter la prise en charge. Il permet également le suivi de ces enfant, évitant les tests de réintroduction trop précoces

Author: Marine Godignon
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Languages : fr
Pages : 0

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Introduction : L' allergie alimentaire constitue un problème de Santé Publique. L' allergie à l' arachide et aux protéines de lait de vache sont fréquentes, la nécessité de poser un diagnostic fiable permet une prise en charge adaptée de l' enfant. L' altération de la qualité de vie pour l' enfant et sa famille ainsi que les risques encourus lors du test de provocation par voie orale (TPO) ont conduit les pédiatres à rechercher une méthode alternative moins risquée mais tout autant sensible et spécifique que le TPO. Ainsi, le test d' activation des basophiles (TAB) pourrait représenter une alternative au gold standard dansle diagnostic de l' allergie alimentaire, le TPO. Objectifs : Nous avons élaboré une nouvelle méthode de calcul du CDsens basée sur 6 concentrations d' allergène. puis nous avons comparé les résultats obtenus à l' issu du TPO à ceux du TAB. Enfin, nous avons déterminé des valeurs seuils pour les différents paramètres du TAB afin de prévoir au mieux la réaction clinique de l' enfant lors de l' ingestion de l' allergène. Méthodes : Nous avons analysé 51 TAB dans le cadre de l' allergie à l' arachide et 20 pour l' allergie aux protéines de lait de vache, l' ensemble de ces patients avait réalisé un TPO le même jour pour l' allergène suspecté. Résultats : Dans le cadre de l' allergie à l' arachide, le CDmax et l' AUC après stimulation par f13 et Ara h 2 pour le CD63 et le CD203c se sont montrés très pertinent pour discriminer les patients allergiques des patients simplement sensibilisés. Ces deux marqueurs se sont révélés corrélés à la dose réactogène et à la sévérité clinique observée lors du TPO, contrairement au CDsens. Sept patients ont eu des résultants discordants (TAB+/TPO-), ces patients étaient pour la mojorité en cours de protocole d' induction de tolérance par voie orale (ITO). Concernant les TAB aux protéines de lait de vache, les résultats ont été plus difficilement exploitables. En effet, sur les 20 TAB réalisés seulement 10 ont pu être exploité, 10 avaient été exclus en raison d' une activation des basophiles dans le contrôle négatif. Le CDmax et l' AUC après stimulation par f2 et f78 pour le CD63 et CD203c ont montré une corrélation avec la dose réactogène. Concernant l' activation des basophiles dans le contrôle négatif observée pour 10 patients, le dosage des IgE spécifiques dirigées contre 12 albumines différentes a été réalisé. Les 10 patients présentaient une sensibilisation contre au moins une de ces albumines. Conclusion : Le TAB montre ainsi son intérêt dans le diagnostic de l' allergie à l' arachide par le suivi du CDmax ou l' AUC. Une mise en routine et une standardisation de ce test permettraient de diminuer considérablement le nombre de TPO. Concernant les TAB aux protéines de lait de vache, la poursuite de cette étude sur une plus grande cohorte de patients serait nécessaire. Cependant, les premiers résultats obtenus montraient que le CDmax et l' AUC pourraient être des outils pertinents dans le cadre de l' allergie aux protéines de lait de vache. Il serait intéressant de mettre en place un nouveau protocole de TAB pour le lait de vache afin d' éviter l' activation des basophiles dans le contrôle négatif.

Author: Marion Raveau
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CONTEXTE : Les allergies à l'arachide, à la noisette et aux protéines de lait de vache sont parmi les plus fréquentes chez les enfants et peuvent être responsables de réactions sévères. Le diagnostic positif précis repose sur différents tests dont le test de provocation oral (TPO), pourvoyeur potentiellement de réactions graves chez le patient. Dans ce contexte est apparu une alternative, le test d'activation des basophiles (TAB), qui permet de déterminer l'équivalent d'un seuil réactogène in vitro sur une simple prise de sang. OBJECTIF : L'objectif initial est de déterminer la place du TAB vis-à-vis des autres outils diagnostiques de l'allergie alimentaire en comparant ses différents marqueurs (CDmax, le CDsens et l'AUC) au résultat du TPO pratiqué le même jour. Puis de définir les seuils réactogènes optimaux du TAB, afin de prédire le résultat du TPO, la dose réactogène ainsi que la sévérité des réactions cliniques potentielles. MÉTHODE : Nous avons analysé les données des TAB en parallèle des TPO réalisés à l'hôpital de jour de pédiatrie, en nous basant uniquement sur l'analyse du marqueur CD63, chez 108 enfants allergiques à l'arachide, 27 à la noisette et 50 aux protéines de lait de vache. Des seuils quantitatifs optimaux ont été définis pour le CDmax, le CDsens et l'AUC, en utilisant la méthode de Youden. RÉSULTATS : Concernant l'allergie à l'arachide, 10 patients ont été exclus en raison d'un TAB ininterprétable. Parmi les 98 enfants inclus, nous avons trouvé 80.6 % de concordance entre les résultats du TAB et du TPO dans le diagnostic de l'allergie à l'arachide. L'analyse des courbes ROC des paramètres du TAB a montré que le CDmax et l'AUC après stimulation par f13 ou Ara h 2 semblaient être les meilleurs marqueurs associés à une réactivité lors du TPO avec une excellente valeur prédictive positive et une très bonne valeur prédictive négative. Nous avons également démontré que la survenue d'une réaction en deçà d'une dose réactogène seuil fixée à 200 mg de protéine d'arachide (correspondant à l'ED50) pouvait être anticipée par l'analyse des données du TAB chez les patients allergiques. Néanmoins, bien qu'une corrélation entre le TAB et le grade de la réaction lors du TPO ait été observée, l'analyse des patients selon l'intensité des symptômes survenus lors du TPO n'a pas permis d'identifier de marqueurs prédictifs de la gravité des réactions. Concernant l'allergie à la noisette, nous avons montré que les 3 marqueurs du TAB (CDmax, AUC et CDsens) semblaient être des marqueurs fiables pour prédire la réactivité lors du TPO. Les seuils quantitatifs optimaux ont tous atteint une VPP de 100 %. De façon intéressante, nous avons montré que le TAB semblait être un bon moyen pour prédire une réaction en dessous d'une dose réactogène seuil (fixée à partir de l'ED50 à 80.6 mg de protéines) et la sévérité clinique des réactions observées lors du TPO. Pour l'allergie aux protéines de lait de vache, l'analyse a été limitée par le nombre important de TAB ininterprétables, pour des raisons techniques que nous avons identifiées, entraînant l'exclusion de 23 patients (46%). Nous avons montré que le TAB permettait de mettre en évidence de façon fiable les patients non (ou plus) allergique grâce à la définition de seuils optimaux déterminés à partir de courbes ROC, avec une excellente valeur prédictive négative pour l'ensemble des marqueurs du TAB (CDmax (95.8 %), AUC (95.7 %), CDsens (100 %)). CONCLUSION : L'ensemble de ces résultats apportent des éléments objectifs laissant penser que le TAB est un outil complémentaire intéressant dans le diagnostic des allergies à l'arachide, à la noisette et aux protéines de lait de vache, permettant notamment d'éviter la réalisation de TPO inutiles chez des patients tolérants envers l'allergène et une adaptation personnalisée des protocoles de TPO dans le cas des allergies sévères pour éviter les risques liés à ce test.

Author: Amandine Rubio
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Languages : fr
Pages : 94

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A ce jour, aucune donnée clinique ou biologique ne permet de prédire avec certitude la persistance ou la disparition de l’allergie alimentaire chez l’enfant. La décision de réaliser un test de provocation orale (TPO) doit reposer sur des tests préliminaires en raison des risques et du coût impliqués. Le but de cette étude est d’évaluer l’apport du test d’activation des basophiles (TAB) dans la prédiction de la réaction de l’enfant au TPO au lait, à l’œuf et à l’arachide, en le comparant aux IgE spécifiques. Le degré d’activation des basophiles en réponse à l’allergène était mesuré en cytométrie de flux par l’augmentation d’expression membranaire de CD63. Des seuils de positivité de TAB adaptés à l’allergène étaient établis par des courbes ROC. Parmi les 78 enfants inclus, 30 ont réagi au TPO. Le TAB était interprétable chez 72 enfants. Avec un seuil de 6% associé à un ratio allergène/CP > 0,22, le TAB au lait avait une sensibilité de 100%, une spécificité de 94%, une valeur prédictive positive (VPP) de 88% et négative (VPN) de 100%, et un facteur de corrélation avec le TPO φ de 91%. L’aire sous la courbe ROC pour le TAB au lait était de 0,94. Le nombre de patients inclus à ce jour pour l’œuf et l’arachide était trop faible pour définir des seuils de positivité spécifiques pour le TAB. Avec le seuil de 15%, le TAB à l’œuf avait une sensibilité de 67%, une spécificité de 100%, une VPP de 100%, une VPN de 64% et un facteur de corrélation φ de 0,65. La corrélation entre le TAB à l’arachide et le TPO n’était pas statistiquement significative. Malgré tout, les résultats du TAB étaient meilleurs que ceux des IgE. Le TAB semble être un outil biologique précieux dans la prise en charge de l’enfant allergique. Il serait en particulier d’un grand apport pour la décision d’entreprendre au plus tôt un TPO avec un minimum de danger.

Author: Alexandra Chapuis
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L'allergie à l'arachide constitue l'une des hypersensibilités allergiques alimentaires les plus fréquemment rencontrées en pratique clinique. Actuellement, de nombreuses études et protocoles d'immunothérapie spécifique (ITS) sont en cours d'investigation. Ces derniers permettent de ré-induire un état de tolérance, autorisant à nouveau le contact avec l'allergène incriminé sans apparition de manifestation clinique. Dans ce contexte, le développement de marqueurs biologiques permettant de prédire le seuil réactogène et la sévérité d'une réaction allergique, pourraient participer à l'amélioration significative de la prise en charge des patients allergiques et du suivi de l'efficacité des protocoles d'ITS. Au cours de ce travail, nous avons évalué l'intérêt du test d'activation des basophiles (TAB) dans le cadre du suivi d'un protocole d'ITS à l'arachide par voie orale, chez une population d'adolescents allergiques. Nos résultats montrent que le TAB, réalisé avec un extrait total d'arachide (f13), et plus particulièrement le paramètre "CD-sens" reflétant la sensibilité des basophiles, est corrélé au seuil réactogène clinique à l'arachide. En revanche, de façon surprenante, l'utilisation d'un allergène moléculaire majeur de l'arachide (Ara h 2) n'a pas mis en évidence une corrélation des résultats du TAB au seuil réactogène. Le TAB, réalisé avec l'extrait allergénique total, semble ainsi se positionner comme un outil biologique efficace, reproductible et rapide, permettant de suivre l'efficacité d'un protocole d'ITS de façon non invasive.

Author: Bernard Pernollet (médecin.)
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Author: Jocelyne Just
Publisher: Elsevier Health Sciences
ISBN: 2294750136
Category : Medical
Languages : fr
Pages : 324

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Depuis une quinzaine d’années, les allergies alimentaires sont devenues un problème de santé publique. Leur prévalence a non seulement doublé, mais les formes cliniques sévères ou complexes deviennent de plus en plus fréquentes. De nouvelles affections émergent. Dans un contexte où l’allergologie, en constante évolution, se constitue en spécialité médicale à part entière, il est devenu impératif pour les professionnels de mettre à jour leurs connaissances pour adapter au mieux leur pratique quotidienne. Ce livre consacrée aux allergies alimentaires se concentre sur les nouveaux concepts, les affections actuelles, les perspectives thérapeutiques. Des experts français, médecins ou chercheurs reconnus dans le domaine des allergies alimentaires, ont collaboré à cet ouvrage pour faire le point à partir des connaissances et des avancées les plus récentes : allergologues, pédiatres, dermatologues, pneumologues, internistes, gastro-entérologues, nutritionnistes, immunologistes, biologistes, experts en sécurité alimentaire... Cette diversité témoigne de la dimension transversale de l’allergologie. Cet ouvrage vous permettra d’abord de comprendre l’épidémiologie et les mécanismes complexes – génétiques, immunologiques, moléculaires – des allergies alimentaires. Il aborde ensuite la diversité et l’actualité des affections, les progrès de la biologie puis le traitement et des perspectives nouvelles. Il intègre les dimensions de prévention mais aussi d’éducation et d’intégration, dans le cadre d’une prise en charge globale et personnalisée, adaptée au profil et aux besoins du patient, et finalement la problématique de la sécurité alimentaire. Cet ouvrage sera un outil indispensable pour les allergologues mais aussi les médecins généralistes, les pédiatres, tous les spécialistes et professionnels paramédicaux impliqués dans le domaine des allergies alimentaires.

Author: Alexandra Masson
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Languages : fr
Pages : 150

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Objectif : Mettre en évidence en pédiatrie une corrélation entre les manifestations cliniques initiales d’allergie alimentaire IgE dépendante et l’expression différentielle des marqueurs d’activation sur les polynucléaires. Matériel et méthode : Les cytométries en flux (CMF) réalisées en pédiatrie lors d’un bilan d’allergie alimentaire IgE-médiée pour les allergènes les plus fréquents ont été étudiées. L’activation des polynucléaires a été analysée avec plusieurs marqueurs : le CD63 et le CD11b pour les basophiles et le CD11b pour les éosinophiles et les neutrophiles. Résultats : 79 enfants ont été inclus et 55 avaient une CMF positive pour au moins un allergène. L’activation des basophiles était prédominante en CD63. Quand cette activation était par le CD11b l’ensemble des polynucléaires était activé (p=0,0036). L’activation cellulaire implique plus particulièrement le CD63 dans l’urticaire et le CD11b dans l’eczéma (différence non significative). Pour 2 enfants l’activation pour les basophiles était exclusivement par le CD11b. Les éosinophiles de même que les neutrophiles étaient activés par l’allergène dans 40% des cas. L’activation des éosinophiles et/ou des neutrophiles par l’anti-IgE n’était observée que dans 40% des cas. Conclusion : Le CD11b est un marqueur d’activation et de migration des basophiles ce qui n’avait jamais été étudié pour ce polynucléaire. Dans notre étude, l’activation des éosinophiles et des neutrophiles dans l’allergie alimentaire est confirmée par la surexpression du marqueur CD11b. Pour ces cellules, la voie IgE dépendante ne semble pas être la seule (rôle des IgA et/ou IgG ?). L’allergie alimentaire apparaît comme une coopération cellulaire de l’ensemble des polynucléaires en réponse à un allergène. Aucune corrélation entre des symptômes cliniques et un profil immunologique n’a été mise en évidence.