CARTOGRAPHIE DU GENOME HUMAIN PAR HYBRIDATION IN SITU FLUORESCENTE PDF Download
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Author: DORRA.. CHERIF
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Languages : fr
Pages : 282
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Book Description
NOTRE TRAVAIL EST UNE CONTRIBUTION A L'ETUDE DU GENOME HUMAIN A L'AIDE DES TECHNIQUES D'HYBRIDATION IN SITU FLUORESCENTE SUR CHROMOSOMES. LA PREMIERE PARTIE A ETE CONSACREE A LA MISE AU POINT DE L'HYBRIDATION IN SITU COMME METHODE DE CARTOGRAPHIE PHYSIQUE DU GENOME. LA LOCALISATION DE SEQUENCES D'ADN PEU OU MOYENNEMENT AMPLIFIEES, NOUS A PERMIS D'ETUDIER L'EVOLUTION DE L'AMPLIFICATION DE L'ONCOGENE MYC DANS DES LIGNEES TUMORALES, ET DE METTRE EN EVIDENCE UN PHENOMENE INATTENDU DE TRANSPOSITION DES SEGMENTS V#H DES GENES DES IMMUNOGLOBULINES. QUANT AUX SEQUENCES UNIQUES D'ADN, NOUS POUVONS LES DETECTER AVEC DES SONDES D'ADN > 1 KB. LA MISE EN POINT D'UN SYSTEME DE BANDES FLUORESCENTES, PERMETTANT DE VISUALISER SIMULTANEMENT LE SIGNAL D'HYBRIDATION ET LES BANDES R, A FACILITE L'UTILISATION COURANTE DE CETTE METHODE POUR LA CARTOGRAPHIE. NOUS AVONS AINSI ETABLI UNE CARTE PARTIELLE DU CHROMOSOME 11Q AVEC UNE SOIXANTAINE DE MARQUEURS, DONT LA MOITIE SONT LOCALISE DANS LA REGION 11Q22-Q23, CONTENANT LE GENE DE L'ATAXIE TELANGIECTASIE (AT). L'ORDRE DE CERTAINS MARQUEURS LOCALISES DANS LA REGION AT A ETE PRECISE PAR CARTOGRAPHIE SUR NOYAUX EN INTERPHASE. C'EST COMME OUTIL D'ANALYSE CYTOGENETIQUE DES CELLULES CANCEREUSES QUE L'HYBRIDATION IN SITU A ETE DEVELOPPEE DANS LA DEUXIEME PARTIE DE NOTRE TRAVAIL. NOUS AVONS PRIS COMME MODELE LES REARRANGEMENTS DE LA BANDE 11Q23 DANS LES LEUCEMIES AIGUES A MONOCYTES (LAM-M5). DES TRANSLOCATIONS DIFFICILES A ANALYSER PAR LES TECHNIQUES DE BANDES ONT PU ETRE MIS EN EVIDENCE, ET LA POSITION DE CERTAINS POINTS DE CASSURE A ETE PRECISEE. EN COMBINANT HYBRIDATION IN SITU ET ANALYSE MOLECULAIRE, DES DELETIONS DES SEQUENCES SITUEES EN 3' PAR RAPPORT AU SEGMENT CONTENANT LES POINTS DE CASSURE DES TRANSLOCATIONS 11Q23, ONT ETE RETROUVEES DANS PLUS DU QUART DES CAS, SUGGERANT L'IMPLICATION D'UN HYPOTHETIQUE GENE SUPRESSEUR DE TUMEUR DANS LE PROCESSUS LEUCEMOGENE
Author: DORRA.. CHERIF
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Pages : 282
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NOTRE TRAVAIL EST UNE CONTRIBUTION A L'ETUDE DU GENOME HUMAIN A L'AIDE DES TECHNIQUES D'HYBRIDATION IN SITU FLUORESCENTE SUR CHROMOSOMES. LA PREMIERE PARTIE A ETE CONSACREE A LA MISE AU POINT DE L'HYBRIDATION IN SITU COMME METHODE DE CARTOGRAPHIE PHYSIQUE DU GENOME. LA LOCALISATION DE SEQUENCES D'ADN PEU OU MOYENNEMENT AMPLIFIEES, NOUS A PERMIS D'ETUDIER L'EVOLUTION DE L'AMPLIFICATION DE L'ONCOGENE MYC DANS DES LIGNEES TUMORALES, ET DE METTRE EN EVIDENCE UN PHENOMENE INATTENDU DE TRANSPOSITION DES SEGMENTS V#H DES GENES DES IMMUNOGLOBULINES. QUANT AUX SEQUENCES UNIQUES D'ADN, NOUS POUVONS LES DETECTER AVEC DES SONDES D'ADN > 1 KB. LA MISE EN POINT D'UN SYSTEME DE BANDES FLUORESCENTES, PERMETTANT DE VISUALISER SIMULTANEMENT LE SIGNAL D'HYBRIDATION ET LES BANDES R, A FACILITE L'UTILISATION COURANTE DE CETTE METHODE POUR LA CARTOGRAPHIE. NOUS AVONS AINSI ETABLI UNE CARTE PARTIELLE DU CHROMOSOME 11Q AVEC UNE SOIXANTAINE DE MARQUEURS, DONT LA MOITIE SONT LOCALISE DANS LA REGION 11Q22-Q23, CONTENANT LE GENE DE L'ATAXIE TELANGIECTASIE (AT). L'ORDRE DE CERTAINS MARQUEURS LOCALISES DANS LA REGION AT A ETE PRECISE PAR CARTOGRAPHIE SUR NOYAUX EN INTERPHASE. C'EST COMME OUTIL D'ANALYSE CYTOGENETIQUE DES CELLULES CANCEREUSES QUE L'HYBRIDATION IN SITU A ETE DEVELOPPEE DANS LA DEUXIEME PARTIE DE NOTRE TRAVAIL. NOUS AVONS PRIS COMME MODELE LES REARRANGEMENTS DE LA BANDE 11Q23 DANS LES LEUCEMIES AIGUES A MONOCYTES (LAM-M5). DES TRANSLOCATIONS DIFFICILES A ANALYSER PAR LES TECHNIQUES DE BANDES ONT PU ETRE MIS EN EVIDENCE, ET LA POSITION DE CERTAINS POINTS DE CASSURE A ETE PRECISEE. EN COMBINANT HYBRIDATION IN SITU ET ANALYSE MOLECULAIRE, DES DELETIONS DES SEQUENCES SITUEES EN 3' PAR RAPPORT AU SEGMENT CONTENANT LES POINTS DE CASSURE DES TRANSLOCATIONS 11Q23, ONT ETE RETROUVEES DANS PLUS DU QUART DES CAS, SUGGERANT L'IMPLICATION D'UN HYPOTHETIQUE GENE SUPRESSEUR DE TUMEUR DANS LE PROCESSUS LEUCEMOGENE
Author: Karine Monier
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Languages : en
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Author: ISABELLE.. LEGER
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Languages : fr
Pages : 0
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LES TRAVAUX PRESENTES DANS CETTE THESE S'INTEGRENT DANS LE PROJET EUROPEEN HUMAN GENOME; ILS S'INSCRIVENT PLUS PRECISEMENT DANS LE CONTEXTE DE L'ANALYSE IN SITU DE L'ORGANISATION DU GENOME HUMAIN. AVEC POUR OBJECTIF DE DEVELOPPER DES APPROCHES ORIGINALES DE CARTOGRAPHIE PHYSIQUE ET FONCTIONNELLE, NOUS AVONS MIS AU POINT DES METHODES D'ANALYSE INTERACTIVE D'IMAGES DE SONDES HYBRIDEES IN SITU ADAPTEES A L'ORDONNANCE LINEAIRE DE GENES SUR LA MOLECULE D'ADN ET A L'ETUDE DE LA DISTRIBUTION DE SEQUENCES GENOMIQUES DANS LE NOYAU CELLULAIRE INTERPHASIQUE. TIRANT PROFIT DES AVANTAGES DU SYSTEME HOME (HIGHLY OPTIMIZED MICROSCOPE ENVIRONMENT) APPLIQUE A LA MICROSCOPIE EN FLUORESCENCE, SEPT GENES CODANT POUR DES PROTEINES EN DOIGTS DE ZINC ONT ETE ORDONNES SUR LE CHROMOSOME 19 PAR CARTOGRAPHIE INTERPHASIQUE. SI L'ADEQUATION DU SYSTEME HOME POUR CETTE APPROCHE CARTOGRAPHIQUE EST CONFIRMEE, NOUS SERONS A MEME DE FOURNIR UNE METHODE ADAPTEE A LA LOCALISATION PRECISE ET RAPIDE DE SEQUENCES SPECIFIQUES SUR LE GENOME, RAPPROCHANT AINSI PAR UN RACCOURCI OPERATIONNEL APPRECIABLE, LES ACQUIS DE LA GENETIQUE MOLECULAIRE ET DE LA CYTOGENETIQUE POUR UNE CONNAISSANCE CARTOGRAPHIQUE ACCELEREE DU GENOME HUMAIN. DANS LA PERSPECTIVE D'OUVRIR DE NOUVELLES VOIES D'INVESTIGATION POUR L'ANALYSE DES RELATIONS SPATIALES ET FONCTIONNELLES ADN-PROTEINES DANS LE NOYAU INTERPHASIQUE, NOUS AVONS DEVELOPPE UNE TECHNIQUE COMBINANT L'HYBRIDATION IN SITU DE SONDES FLUORESCENTES ET LA DETECTION IMMUNO-CYTOCHIMIQUE DE PROTEINES NUCLEAIRES. LA CO-LOCALISATION DU CENTROMERE DU CHROMOSOME 1 ET DES NUCLEOLES A AINSI ETE MISE EN EVIDENCE DANS UNE LIGNEE CELLULAIRE DE CANCER DU SEIN DONT LES CARACTERISTIQUES GENETIQUES AVAIENT ETE PREALABLEMENT DETERMINEES PAR LA CYTOGENETIQUE INTERPHASIQUE. L'ANALYSE INTERACTIVE DES IMAGES OBTENUES APRES DOUBLE MARQUAGE, NOUS A PERMIS DE DOCUMENTER LA SIGNIFICATION FONCTIONNELLE DE L'ASSOCIATION ENTRE LE CHROMOSOME 1 ET LES NUCLEOLES.
Author: Isabelle Leger
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Languages : fr
Pages : 223
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LES TRAVAUX PRESENTES DANS CETTE THESE S'INTEGRENT DANS LE PROJET EUROPEEN HUMAN GENOME; ILS S'INSCRIVENT PLUS PRECISEMENT DANS LE CONTEXTE DE L'ANALYSE IN SITU DE L'ORGANISATION DU GENOME HUMAIN. AVEC POUR OBJECTIF DE DEVELOPPER DES APPROCHES ORIGINALES DE CARTOGRAPHIE PHYSIQUE ET FONCTIONNELLE, NOUS AVONS MIS AU POINT DES METHODES D'ANALYSE INTERACTIVE D'IMAGES DE SONDES HYBRIDEES IN SITU ADAPTEES A L'ORDONNANCE LINEAIRE DE GENES SUR LA MOLECULE D'ADN ET A L'ETUDE DE LA DISTRIBUTION DE SEQUENCES GENOMIQUES DANS LE NOYAU CELLULAIRE INTERPHASIQUE. TIRANT PROFIT DES AVANTAGES DU SYSTEME HOME (HIGHLY OPTIMIZED MICROSCOPE ENVIRONMENT) APPLIQUE A LA MICROSCOPIE EN FLUORESCENCE, SEPT GENES CODANT POUR DES PROTEINES EN DOIGTS DE ZINC ONT ETE ORDONNES SUR LE CHROMOSOME 19 PAR CARTOGRAPHIE INTERPHASIQUE. SI L'ADEQUATION DU SYSTEME HOME POUR CETTE APPROCHE CARTOGRAPHIQUE EST CONFIRMEE, NOUS SERONS A MEME DE FOURNIR UNE METHODE ADAPTEE A LA LOCALISATION PRECISE ET RAPIDE DE SEQUENCES SPECIFIQUES SUR LE GENOME, RAPPROCHANT AINSI PAR UN RACCOURCI OPERATIONNEL APPRECIABLE, LES ACQUIS DE LA GENETIQUE MOLECULAIRE ET DE LA CYTOGENETIQUE POUR UNE CONNAISSANCE CARTOGRAPHIQUE ACCELEREE DU GENOME HUMAIN. DANS LA PERSPECTIVE D'OUVRIR DE NOUVELLES VOIES D'INVESTIGATION POUR L'ANALYSE DES RELATIONS SPATIALES ET FONCTIONNELLES ADN-PROTEINES DANS LE NOYAU INTERPHASIQUE, NOUS AVONS DEVELOPPE UNE TECHNIQUE COMBINANT L'HYBRIDATION IN SITU DE SONDES FLUORESCENTES ET LA DETECTION IMMUNO-CYTOCHIMIQUE DE PROTEINES NUCLEAIRES. LA CO-LOCALISATION DU CENTROMERE DU CHROMOSOME 1 ET DES NUCLEOLES A AINSI ETE MISE EN EVIDENCE DANS UNE LIGNEE CELLULAIRE DE CANCER DU SEIN DONT LES CARACTERISTIQUES GENETIQUES AVAIENT ETE PREALABLEMENT DETERMINEES PAR LA CYTOGENETIQUE INTERPHASIQUE. L'ANALYSE INTERACTIVE DES IMAGES OBTENUES APRES DOUBLE MARQUAGE, NOUS A PERMIS DE DOCUMENTER LA SIGNIFICATION FONCTIONNELLE DE L'ASSOCIATION ENTRE LE CHROMOSOME 1 ET LES NUCLEOLES
Author: MICHEL.. TEBOUL
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Languages : fr
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Author: FREDERIQUE.. TIHY
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Category :
Languages : fr
Pages : 201
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L'HYBRIDATION IN SITU PERMET DE VISUALISER UNE SEQUENCE D'ADN DIRECTEMENT SUR LE NOYAU INTERPHASIQUE ET LES CHROMOSOMES. NOUS AVONS UTILISE CETTE METHODE AFIN D'ETUDIER DIFFERENTS LOCUS DU GENOME HUMAIN, EN PARTICULIER LES GENES DE LA DYSTROPHINE ET DU RETINOBLASTOME. L'HYBRIDATION DES SEQUENCES DU GENE DE LA DYSTROPHINE NOUS A APPORTE PLUSIEURS INFORMATIONS. ELLE NOUS A PERMIS DE DETERMINER QUE LE CHROMOSOME X PORTEUR D'UNE DELETION DANS LE GENE DE LA DYSTROPHINE EST ACTIF DANS 82% DES CELLULES D'UNE FILLETTE ATTEINTE DE DYSTROPHIE MUSCULAIRE DE DUCHENNE ET SEULEMENT DANS 23% DES CELLULES DE SA MERE NON MALADE. L'HYBRIDATION SUR DES NOYAUX INTERPHASIQUES DE SEQUENCES REPARTIES LE LONG DU GENE DE LA DYSTROPHINE NOUS A, PAR AILLEURS, PERMIS D'ETUDIER LA REPLICATION DE LA BANDE XP21.2 DU GENE DE LA DYSTROPHINE. CETTE REPLICATION NOUS EST APPARUE SYNCHRONE LE LONG DE LA BANDE. L'HYBRIDATION DE SEQUENCES RAPPROCHEES NOUS A EGALEMENT PERMIS D'ETUDIER LA CONDENSATION DE L'ADN A LA FOIS POUR LES GENES DE LA DYSTROPHINE, DU RETINOBLASTOME ET POUR D'AUTRES LOCUS. NOUS AVONS AINSI PU METTRE EN EVIDENCE DES VARIATIONS DE CONDENSATION DEPENDANT DU MOMENT DU CYCLE CELLULAIRE ET DES REGIONS DE LA CHROMATINE ETUDIEES. NOUS AVONS EGALEMENT PU CONFRONTER NOS OBSERVATIONS AUX DIFFERENTS MODELES DE REPLIEMENT DE LA CHROMATINE EXISTANTS. NOS OBSERVATIONS NE SONT PAS COMPATIBLES AVEC UN MODELE UNIQUE MAIS VARIENT SELON LA TAILLE DE LA BANDE R ETUDIEE. ENFIN, L'HYBRIDATION DU GENE DU RETINOBLASTOME SUR DES CHROMOSOMES DE PITHECIA PITHECIA, MACACA SYLVANA ET CERCOPITHECUS AETHIOPS TANTALUS, NOUS A PERMIS D'APPUYER L'HYPOTHESE DE GLISSEMENTS CENTROMERIQUES DANS L'EVOLUTION DES CERCOPITHECIDAE PAR LA LOCALISATION, DANS CHAQUE ESPECE, DE LA BANDE HOMOLOGUE A LA BANDE 13Q14 HUMAINE PORTEUSE DU GENE DU RETINOBLASTOME
Author: Charles Auffray
Publisher: FeniXX
ISBN: 2403029424
Category : Medical
Languages : fr
Pages : 111
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Washington, Londres, Tokyo, Paris, Berlin, Pékin, 2000 : plus de 90 % de la séquence du génome humain ont été décrits, annoncent les autorités politiques. Depuis, les gènes impliqués dans des centaines de maladies à composante héréditaire ont été localisés, et un grand nombre de ces gènes identifiés. L’exploration du génome humain nous entraîne au plus profond des rouages de l’hérédité et de la vie, mais la transformation de cette connaissance en applications thérapeutiques est un processus long et difficile qui requiert une étroite interaction entre la recherche fondamentale et l’industrie. Cette démarche doit s’accompagner de mesures éthiques, économiques et juridiques équilibrées, qui respectent la dignité humaine.
Author: Cécile Julier
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ISBN:
Category :
Languages : fr
Pages : 178
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PLUSIEURS CONTRIBUTIONS A LA CARTOGRAPHIE DU GENOME HUMAIN SONT PRESENTEES. PAR CARTOGRAPHIE GENETIQUE, NOUS AVONS CONSTRUIT UNE CARTE DU CHROMOSOME 22 HUMAIN, QUI FUT LA PREMIERE A UTILISER LES METHODES D'ANALYSE MULTILOCUS. DANS LE DOMAINE DE LA CARTOGRAPHIE PHYSIQUE, NOUS AVONS MIS AU POINT UNE TECHNIQUE D'ELECTROPHORESE EN CHAMPS PULSES, QUI PERMET DE SEPARER DE LONGS FRAGMENTS D'ADN. NOUS AVONS EGALEMENT REALISE UNE CARTE GENETIQUE DETAILLEE DU BRAS LONG DU CHROMOSOME 11 (11Q), AU MOYEN DE MARQUEURS POLYMORPHES QUE NOUS AVONS DEVELOPPES, DANS LE BUT DE LOCALISER PUIS D'IDENTIFIER DES GENES IMPLIQUES DANS DES MALADIES MENDELIENNES ET DES MALADIES MULTIFACTORIELLES SITUES DANS CETTE REGION, EN PARTICULIER L'ATAXIE-TELANGIECTASIE ET L'ASTHME. SIMULTANEMENT, NOUS AVONS CONSTRUIT UNE CARTE GENETIQUE DU CHROMOSOME 16. NOUS AVONS ENSUITE TESTE L'IMPLICATION D'UNE REGION CANDIDATE POUR LE DIABETE INSULINO-DEPENDANT (DID), SUR LE CHROMOSOME 11Q, ET REJETE L'HYPOTHESE DE L'EXISTENCE D'UN GENE MAJEUR DANS CETTE REGION. L'EXPLOITATION DE L'IMPLICATION D'UN GENE CANDIDAT POUR LE DID, LE GENE DE L'INSULINE, NOUS A PERMIS D'ETABLIR QUE LA REGION DE CE GENE CONTRIBUE A UNE SUSCEPTIBILITE AU DID. PAR AILLEURS, NOUS AVONS DEVELOPPE UNE STRATEGIE, BASEE SUR LA CROSS-HYBRIDATION DE SONDES D'ADN CONTENANT UN MOTIF REPETE EN TANDEM (VNTR), QUI PERMET DE CARACTERISER RAPIDEMENT UN GRAND NOMBRE DE POLYMORPHISMES DANS DES CROISEMENTS ANIMAUX. CETTE APPROCHE A ETE UTILISEE DANS NOTRE LABORATOIRE POUR LOCALISER DES GENES DE SUSCEPTIBILITE AU DIABETE ET A L'HYPERTENSION DANS DES MODELES ANIMAUX. ENFIN, NOUS PRESENTONS L'APPROCHE GENERALE QUE NOUS UTILISONS POUR RECHERCHER DES GENES DE SUSCEPTIBILITE AU DID, ET PRESENTONS UN BILAN DE NOS CONNAISSANCES SUR LA GENETIQUE DE CETTE MALADIE
Author: ABDELLAH.. BENABDELMOUNA
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Languages : fr
Pages : 120
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UNE METHODOLOGIE DE MARQUAGE DU GENOME PAR HYBRIDATION IN SITU FLUORESCENTE (FISH) A ETE DEVELOPPEE CHEZ PETUNIA HYBRIDA. LES ANALYSES CYTOMETRIQUES ONT MONTRE QUE LA COMPOSITION EN BASES (AT%) EST CONSTANTE (AT% = 59.3%) ALORS QUE LA TAILLE DU GENOME (VALEURS 2C) VARIE D'UN FACTEUR TROIS ET PERMET DE DISTINGUER ENTRE P. PARVIFLORA (2N = 18, 2C = 1.96 PG), P. LINEARIS (2N = 18, 2C = 5.79 PG) ET LES AUTRES ESPECES ETUDIEES (2N = 14, 2C = 2.84 PG). L'HYBRIDATION IN SITU GENOMIQUE (GISH) OU COLORIAGE CHROMOSOMIQUE A PERMIS D'OBTENIR, CHEZ P. HYBRIDA ET CHEZ UN HYBRIDE INTERSPECIFIQUE F1, UN PATTERN D'HYBRIDATION EN BANDES QUI POURRAIT CORRESPONDRE AUX SEQUENCES MICROSATELLITES. LES REGIONS CHROMOSOMIQUES CONSERVEES ENTRE LES ESPECES ETUDIEES ONT EGALEMENT ETE DETERMINEES. L'ETUDE, PAR PCR, DE LA VARIATION INTERSPECIFIQUE DE L'ESPACEUR DE L'ADNR 5S A PERMIS DE DETECTER DEUX UNITES DE REPETITION : UNE UNITE DE REPETITION DE 460 PB CHEZ P. LINEARIS (2N=18) ET P. INTEGRIFOLIA (2N=14), ET UNE UNITE DE REPETITION DE 350 PB CHEZ LES AUTRES ESPECES (2N=14). L'ORGANISATION CHROMOSOMIQUE DES GENES 5S A PERMIS DE DISTINGUER UN GROUPE D'ESPECES A FLEURS COLOREES AVEC UN LOCUS 5S ADJACENT AU LOCUS MAJEUR 18S-5.8S-25S DU CHROMOSOME II ET UN GROUPE D'ESPECES A FLEURS BLANCHES AVEC UN LOCUS ADDITIONNEL SITUE DANS LA REGION PERICENTROMERIQUE DU CHROMOSOME VII. LES OBSERVATIONS FISH ONT REVELE UN LOCUS D'ADNR 18S-5.8S-25S CHEZ P. LINEARIS ET P. PARVIFLORA (2N=18) ET DEUX LOCI CHEZ LES ESPECES DE PETUNIA (2N = 14). ENFIN, LA LOCALISATION PHYSIQUE DE 11 MARQUEURS RAPD ISSUS DE LA CARTE GENETIQUE DE P. HYBRIDA A ETE REALISEE. LES RESULTATS OBTENUS PAR FISH ET PAR HYBRIDATION SOUTHERN ONT MONTRE QUE LA MAJORITE DES CLONES RAPD NE SONT PAS SPECIFIQUES. ILS SONT HAUTEMENT REPETES ET POURRAIENT CORRESPONDRE A DES FAMILLES MULTILOCUS. SEULEMENT TROIS CLONES RAPD ONT REVELE UNE SPECIFICITE AU NIVEAU CHROMOSOMIQUE : OPJ18-250 ET OPV20-350 POUR LES ESPECES A FLEURS BLANCHES ET OPV08-600 POUR LES ESPECES A FLEURS COLOREES MONTRANT AINSI LA POSSIBILITE DE LES UTILISER COMME MARQUEURS D'INTROGRESSION.
Author: Betty Delon
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Category :
Languages : fr
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